⑴多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)仅存在于大豆叶肉细胞中,获取模板RNA的大豆细胞最好取自大豆叶肉细胞;RNA的水解需要RNA酶起作用,所以能抑制RNA酶活性的方法均可。
⑵利用PCR技术扩增目的基因的前提,是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。所以引物中碱基数目越多,特异性越强。
⑶在环状质粒pAHC25上有1个Sac I酶切位点和2个BamH I酶切位点,故这种酶同时处理pAHC25,将会使环状质粒出现三个切口,产生三种不同的片段;因为限制酶Sma I和Sac I都只有单一酶切点,所以对质粒切割后可以保证目的基因插入部位和方向的准确,不会影响基因表达载体的表达。
⑷选择幼胚细胞的原因是幼胚细胞分裂旺盛,全能性高,容易诱导形成植株。