见解析
(1)基因工程的原理是基因重组。(2)抗盐基因直接导入烟草细胞,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制,也不能合成抗盐基因的mRNA,翻译成相应的蛋白质,即不能表达。(3)根据题干信息,在构建重组质粒时,应选用Sal I 和Hind III 两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。(4)基因工程的第四步是目的基因的检测和鉴定。检测是通过质粒上的标记基因来进行的,即把农杆菌放在含有氨苄青霉素和四环素的培养基上进行培养筛选。根据筛选的结果,含目的基因的是4和6菌落中的细菌。而鉴定是通过DNA分子杂交技术,即用放射性同位素标记的抗盐基因做探针,与受体细胞中的DNA分子进行杂交,来确定目的基因存在,还需要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从个体性状水平来鉴定烟草的耐盐性。(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用采用植物组织培养技术,先经过脱分化形成愈伤组织,再经过再分化,即细胞增殖和分化形成胚状体,最后形成完整的植株。整个培养过程,需要添加植物激素中的生长素和细胞分裂素。