微生物的分离和培养试题及答案-高中生物-云返教育

下列叙述正确的是

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类型： 单选题 难度系数：易

微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：

（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。培养皿2、3根据其功能，分别称为培养基、　培养基。
（2）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：　。
（3）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用　法。
（4）上述不含链霉素培养基通常使用的是　，下表是另一种培养基配方，该培养基具有　作用。

成分	KH2PO4	Na2 PO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
含量	1.4g	2.1g	0.2g	0.0g	1.0g	15.0g

（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如右表所示。根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是　（3分）。

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类型： 解答题 难度系数：难

判断题：原核微生物主要有6类,即细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体和衣原体。答　

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类型： 解答题 难度系数：难

A．（16分）纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程。
（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于　培养基。
（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是
A．制作固体培养基时可以加入琼脂。
B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。
D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置。
（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？　。
（4）下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则需选择表中的　培养液。
培养液纤维素纤维素酶NaNO₃牛肉膏K₂HPO₄KClMgSO₄·7H₂OFeSO₄A25g/L———1g/L0.5g/L1g/L0.01g/LB——3g/L—1g/L0.5g/L1g/L0.01g/LC25g/L1ug/L—3g/L1g/L0.5g/L1g/L0.01g/LD25g/L—3g/L—1g/L0.5g/L1g/L0.01g/L
（5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是　。
（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入　指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入　染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。
B．下图是用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

（1）实验步骤②所代表的反应过程是　。
（2）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？　，为什么？　。
（3）为使过程⑧更易进行，可用　处理D的细胞。D细胞一般选用大肠杆菌或枯草杆菌的原因是　。
（4）为了检验步骤⑩是否表达了人的胰岛素，可用　技术进行检测。
（5）基因表达载体含有启动子、目的基因、终止子、复制原点和　。
（6）根治糖尿病的最佳方法是　。

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类型： 解答题 难度系数：难

判断题：钉螺是血吸虫唯一的中间寄主。答

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类型： 解答题 难度系数：难

回答下列关于生物技术实践的问题：
（1）传统发酵技术中，利用微生物发酵生产特定的产物，很多都是中华民族的传统食品。请将下列微生物与对应的发酵产物联系起来：
①乳酸菌 ②根瘤菌 ③蓝藻 ④醋酸菌 ⑤毛霉 ⑥酵母菌 ⑦大肠杆菌 ⑧曲霉
制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的微生物依次是（填相应序号）；其中泡菜制作的原理是（用反应式表示）：。
（2）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化　②调pH　③加棉塞　④包扎　⑤分装　⑥称量正确的顺序为；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是。
（3）菊花的组织培养中要求无菌操作的目的是，在愈伤组织形成过程中常用的培养基是MS培养基，并且需要添加；愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为，此过程（填“需要”或“不需要”）光照。

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类型： 解答题 难度系数：难

判断题：所有的蓝藻门植物都具有固氮的作用。答

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类型： 解答题 难度系数：难

（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了　　和　　　。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是　　　和　　　。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是　　　。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于　　　中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上
接种　　　作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中
有　种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越　。
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐　细菌，这种培养基被
称为　。

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类型： 解答题 难度系数：中

将酵母菌分为a、b、c、d四组，用不同方式培养，其种群增长曲线如图所示。请据图回答下列问题：

(1)a呈现型增长，该种群的生长在20 h之前处于　期，20 h~40 h处于　期。
（2）d呈现　型增长。在100 h~120 h，d的增长率趋于　。若在现有条件下继续培养，其种群数量趋于　（增多或减少）。
（3）随着更换培养液的时间间隔延长，酵母种群的增长率逐渐　，其可能的限制因素是　不足和　积累。

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类型： 解答题 难度系数：中

下表是一种培养基的配方。请回答：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	琼脂	水
0.5g	1g	0.5g	2g	100ml

（1）此培养基的营养要素有类，其中蛋白胨主要提供的是　。
（2）各成分重量确定的原则是　。
（3）在各种成分溶化后培养基灭菌分装前，必须进行的是　。
（4）该培养基按物理性质划分属于　培养基，能培养的细菌的同化作用类型是　。
（5）若有几种杂菌混合在一起，可采用　的方法将它们分离纯化？若细菌中混杂有酵母菌，要将酵母菌分离出来，可在培养基中加入　。

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类型： 解答题 难度系数：中

【生物—生物技术实践】（本题共15分）
某中学杨老师自制大蒜提取液，希望这种简便、经济的提取液能够高效的杀灭餐具上的细菌，杨老师完成了下面的探究实验：
（1）制作提取液：杨老师将大蒜榨汁后制成提取液，具体做法如下表所示。请根据表中数据，在表中的括号内填出1#提取液应加入的冷开水量：

大蒜提取液编号	1#	2#
大蒜（g）	350	350
冷开水（mL）

880
无色食醋（mL）
/
20
（2）使用方法：将餐具浸泡在提取液中10min后取出冲洗。
（3）样品抽取：将经过处理的滤纸贴在餐具表面1min，然后再将滤纸放到50ml无菌水中，充分振荡后制成原液。再取1ml原液加入 ml无菌水中摇匀制成10倍稀释液。
（4）分离及培养：用分离法分离细菌。分别取1ml原液和10倍稀释液，分别加到伊红-美蓝培养基中，用灭菌、消毒后的（用具），将原液和稀释液均匀涂布到整个平板上。每个浓度各做三个培养皿，其目的是。本实验另设1ml无菌水涂布在未接种的培养皿为空白对照，原因是排除。最后在37℃培养48h。
（5）观察记录：在下面的空白处，设计1#提取液实验组的观察记录表：（2分）
（6）结果分析：统计数据，得到消毒前后的菌落总数变化（单位cfu/cm²，每平方厘米样品中含有的细菌群落总数）（每空2分）

总份数
＜1
1-10
10-10²
10²-10³
10³-10⁴
＞10⁴
1#提取液
消毒前
30
0
0
0
3
18
9
消毒后
30
14
12
4
0
0
0
2#提取液
消毒前
33
2
0
0
3
12
16
消毒后
33
19
10
4
0
0
0
根据消毒前后的数据可知：
2#提取液效果高于1#，分析可能的原因：。
请你给杨老师提出需要进一步研究的问题：。

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类型： 解答题 难度系数：中

白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵茵分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：
(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→ →性能测定。为分离鉴定白僵茵产生的各种酶，最为快捷灵敏的方法是　。
(2)分离白僵菌菌种的培养基属于　培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，硫酸铵、硝酸钾属于　营养物质。
(3)白僵菌纯培养常用的接种方法是　和　。
(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行　处理，利用高温可以使微生物的　等物质变性。

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类型： 解答题 难度系数：中

【选修1-生物技术实践】（15分）
利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。某研究所为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。请进一步完善实验内容并回答相关问题：
（1）实验步骤：
①配制以　　　　为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是　　　　　。
②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现　　　　　和透明圈。
③将接种针用　　　　　法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种至　　　　　（填“固体”、“半固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。
④取与①培养基中相同的成分及配比，并加入少量碘液，使制作的培养基呈蓝紫色，灭菌并调节PH，用　　　　　　法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。
⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化及其范围的大小，周围出现　
　　　　　的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。
（2）上述实验步骤中，倒平板和接种的操作都应在超净台上的　　　　　附近进行。
（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于　　　　　　　　培养基，④和⑤所用培养基属于　　　　　培养基。

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类型： 解答题 难度系数：中

有三位同学，利用稀释涂布平板法来测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释10⁶倍的培养基中，得到如下表所示的结果。你认为下列数据中最接近真实值的是

同学	统计菌落数	平均值
甲	230	230
乙	21、212、256	163
丙	222、260	241

A.230 B．163 C．241 D．236

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类型： 解答题 难度系数：中

随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料。生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答以下问题。
（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，　、　和　。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
（2）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是　，形成菌落后可根据菌落周围是否产生　来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行　处理。（“消毒”或“灭菌”）
（3）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从　环境采集。
（4）下表所示为某微生物培养基的配方成分含量成分含量 NaNO₃3 g FeSO₄0.01 g K₂HPO₄1 g (CH₂O) 30 g 琼脂 15 g H₂O 1 000 ml MgSO₄·7H₂O 0.5 青霉素 0.1万单位依用途划分，该培养基属于　培养基。该培养基中的碳源是　。若用该培养基培养纤维素分解菌，应除去的物质是　，应加入的物质是　。不论何种培养基，在各成分溶化后分装前，要进行的是　，接种前要进行的是　。

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类型： 解答题 难度系数：中

如下坐标图表示，一定容器中培养的微生物的生长速率曲线。

（１）与其他生物比较微生物的代谢非常旺盛，其原因是　期，处于该时期的微生物表现出的特点是　。
如果想延迟④段表示的时期的出现，可以采用　的方法；如果想获得大量次级代谢产物，则应使曲线保持在　段。
(3)为了测定培养液中细菌的数目，将500个红细胞与5 mL该培养液混匀，然后制片观察，进行随机统计，结果如下：

	视野l	视野2	视野3	视野4
红细胞数	2l	17	22	20
细菌个数	102	98	106	94

请据表回答下列问题：
①本调查采用了种群密度调查中的　 (方法)的原理。
②在选择视野时，关键除应考虑视野的大小和数量外，还应注意　；计算细菌密度时应取各视野的　．
③该5 mL培养液共含有细菌大约　个。

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类型： 解答题 难度系数：中

根据已学知识，回答下列微生物培养过程中有关的问题：
（1）鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基放在中保温1～2天看有无　，如果没有　说明制作合格，反之则不合格。
（2）细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌　。

A．接种针、手、培养基	B．高压锅、手、接种针
C．培养基、手、接种针	D．接种针、手、高压锅

（3）平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续　的操作，将聚集的菌种逐步　分散到培养基的表面。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度　，然后将不同稀释度的菌液分别　到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
（4）19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是　。

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类型： 解答题 难度系数：中

图示酵母菌的结构模式和生殖图。据图回答：

（1）从细胞核的构造看，酵母菌属于生物。其细胞和细菌细胞最主要差别是　。
（2）[2]的主要化学成分为　，其完成功能的结构基础是　。
（3）图中的酵母菌正在进行　生殖。
（4）用　染料使染色体着色，发现一种酵母菌细胞核中有17条染色体，该酵母菌是　倍体。
（5）酵母菌细胞分裂的意义是　。

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类型： 解答题 难度系数：中

I、苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。 KH₂PO₄1.4g Na₂HPO₄2.1g MgSO₄·7H₂O 0.2g FeCl₃0.1 g X 1g 维生素微量琼脂 15g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL （1）此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供和　，该培养基从作用看属于　。
（2）下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是　，图B效果的接种方法是　。

II、根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
（1）菊花的组织培养常用的培养基是　，原理是　。
（2）月季的花药离体培养，从花粉粒的选择上看，应选择　期的花粉粒为宜。
（3）从茶籽中提取茶油一般最好采用　法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是　法。

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类型： 解答题 难度系数：中

生物技术已在生产、生活中得到广泛应用，给人们带来了很好的经济效益，大大提高了人们的生活水平。请回答下列问题：
（1）利用微生物发酵可以获得果酒、果醋。在果酒基础上酿制果醋的过程中，除需接种醋酸菌外，还必须保持条件。
（2）从生物体内提取出来的酶，将其分离提纯的最简便方法是。其原理是利用蛋白质分子的大小、形状和的不同，产生不同的迁移速率来进行分离。
（3）从自然界中获得的微生物必须经过才能应用乎工业生产。果汁生产中常用的果胶酶广泛存在于植物果实和微生物中，工业上通常采用等微生物发酵来生产果胶酶。
（4）从胡萝卜中提取胡萝卜索，常用作为溶剂，原因是。
（5）水蒸气蒸馏法（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是，用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、过滤、浓缩。

答案解析

类型： 解答题 难度系数：中

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